MGC-803(人胃癌細胞)

一、細胞基本屬性

細胞名稱：MGC-803人胃癌細胞

英文名稱：Human Gastric Cancer Cells

別名：MGC803，人胃癌細胞

種屬來源：人

組織來源：胃

生長特性：貼壁生長

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

背景介紹：從一位53歲男性原發(fā)性胃低分化粘液樣腺癌患者建立。

支原體檢測：無

培養(yǎng)基：90% 1640+10% FBS

培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件：無血清凍存液，液氮儲存

細胞貨期：1-2周

運輸方式：復(fù)蘇發(fā)貨（T25瓶免運輸費用）/  凍存發(fā)貨（需加干冰運輸費用） 順豐快遞

供應(yīng)限制：僅限于科學(xué)研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用

規(guī)格：T25或1mL凍存管 形態(tài)：上皮細胞樣，貼壁生長

傳代：1:2至1:3 每周3次

二、細胞培養(yǎng)操作

1、收貨處理

• T25瓶

  觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁，將T25瓶置于37度培養(yǎng)箱放置2-4h，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)
  

• 凍存管

  收到細胞后，需立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇

2、傳代密度

• T25瓶

      細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)

• 凍存管

  第二天換液并檢查細胞密度
  

3、傳代方法

• T25瓶

     a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
     b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min（視細胞情況而定），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作              臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
     c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

• 凍存管

     將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中，加入約4 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

4、注意事項

• T25瓶

    1.運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 

    2.因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。

• 凍存管

    1.收貨時若發(fā)現(xiàn)干冰化完，檢查凍存管是否融化，若已融化需直接離心細胞接種觀察，若未融化可以將細胞按正常步驟保存；
    2.為保證細胞的高存活率，收到產(chǎn)品后，請立即解凍復(fù)蘇細胞。

5、到貨須知

1.收到細胞后，首先觀察并拍照記錄細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，干冰運輸?shù)募毎麢z查干冰是否揮發(fā)，細胞是否解凍，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2.靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照（當(dāng)天以及第 2,3 天請拍照），記錄細胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。

3.由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
4.仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
三、細胞凍存操作

凍存液配方：無血清凍存液，液氮儲存

細胞密度：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例

凍存方法：

a、收集細胞，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數(shù)。
b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

注意事項：凍存細胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復(fù)蘇一管檢查細胞凍存活性，若有異常，及時調(diào)整實驗方案

四、售后服務(wù)

重發(fā)標(biāo)準(zhǔn)：

1.細胞運輸途中遭遇的各種問題，細胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等，重發(fā)；

2.收到細胞未開封，如出現(xiàn)污染狀況，重發(fā)；

3.收到細胞3天內(nèi)，發(fā)現(xiàn)污染問題，經(jīng)核實后，重發(fā)；

4.常溫發(fā)貨的細胞靜置 2 小時后，干冰凍存發(fā)貨的細胞復(fù)蘇 2 天后，絕大多數(shù)細胞未存活，經(jīng)核實后，重發(fā)；

5.常溫發(fā)貨的細胞靜置 22 小時并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細胞復(fù)蘇 2 天后，出現(xiàn)污染，經(jīng)核實后，重發(fā)；

6.細胞活性問題，請在收到產(chǎn)品 3 天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果，用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，經(jīng)核實后，重發(fā)；

7.視具體情況而定。

不予重發(fā)：

1.客戶操作造成細胞污染，不重發(fā)；

2.客戶嚴(yán)重操作失誤致細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；

3.非我們推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；

4.細胞狀態(tài)不好，未提供真實清晰的培養(yǎng)前 3 天的細胞狀態(tài)照片，不重發(fā)；

5.細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題的，不重發(fā)；

6.收到細胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的，不重發(fā)；

7.視具體情況而定。

僅用于科研，不能用于臨床診斷！所有產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于人或動物的治療等任何其他用途，不為任何個人提供產(chǎn)品和服務(wù)。以實際收貨產(chǎn)品說明書為準(zhǔn)，網(wǎng)站說明書僅供參考。