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MCF-7-DDP細(xì)胞一、基本特性細(xì)胞名稱：MCF-7-DDP描述：采用順鉑逐漸增加劑量和間歇大劑量沖擊相結(jié)合的方法誘導(dǎo)MCF-7細(xì)胞對(duì)順鉑的耐藥性，細(xì)胞對(duì)順鉑的zui大耐受性達(dá)5μg/mL。細(xì)胞形態(tài)：上皮樣組織來(lái)源：胸水細(xì)胞活力：95％（ViabilitybyTrypanBlueExclusion）細(xì)胞檢測(cè)：細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌培養(yǎng)條件：RPMI-1640(Gibco,31800-022)，90%；胎牛血清，10%。氣相：空氣，95...

購(gòu)買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少，大都是因?yàn)殡x心過(guò)程操作上的失誤，造成細(xì)胞的物理性損傷，以及細(xì)胞流失。建,議細(xì)胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。

ELISA棋盤滴定滴定的目的就適找到*的濃度條件。方法就是每行用不同的濃度條件，然后每列用不同的濃度條件滴定微孔板，例如：低物液A和B工作濃度的卻定就是先在96微孔板上標(biāo)記酶標(biāo)抗體（濃度一般要稀一些）把A低物液倍比稀釋（1：10開(kāi)始）1，2，4，8，16，32每種濃度各兩孔（橫排12個(gè)孔），再把低物液B用同樣方法稀釋（根據(jù)實(shí)際低物和酶的預(yù)計(jì)比例范圍）倍比稀釋。加入到微孔板后顯色，反應(yīng)15分鐘（一般要避光）讀值找到*濃度。

單克隆抗體的克隆化方法克隆的時(shí)間一般說(shuō)來(lái)越早越好。因?yàn)樵谶@個(gè)時(shí)期各種雜交瘤細(xì)胞同時(shí)旺盛生長(zhǎng)，互相爭(zhēng)奪營(yíng)養(yǎng)和空間，而產(chǎn)生抗體的細(xì)胞有被淹沒(méi)和淘汰的可能。但克隆時(shí)間也不宜太早，太早細(xì)胞性狀不穩(wěn)定，數(shù)量少也易丟失。克隆化的陽(yáng)性雜交瘤細(xì)胞，經(jīng)過(guò)一段時(shí)期培養(yǎng)之后，也還會(huì)因?yàn)榧?xì)胞突變或特定染色體的丟失，使部分細(xì)胞喪失產(chǎn)生抗體的能力，所以需要再次或多次克隆化培養(yǎng)?？寺』螖?shù)的多少由分泌能力強(qiáng)弱和抗原的免疫性強(qiáng)弱而決定。一般說(shuō)，免疫性強(qiáng)的抗原克隆次數(shù)可少一些，但至少要3～5次克隆才能穩(wěn)定。克...

采用ProfinityeXactTM融合標(biāo)簽表達(dá)系統(tǒng)純化無(wú)標(biāo)簽的重組蛋白親和標(biāo)簽已成為后基因組學(xué)時(shí)代純化重組蛋白常用手段。此方法無(wú)需了解蛋白質(zhì)的生化特性或生理活性，就可通過(guò)帶標(biāo)簽的重組融合蛋白選擇性地與層析基質(zhì)上的配體結(jié)合，從而得以純化任何蛋白質(zhì)。此方法與常規(guī)的層析方法不同之處在于，針對(duì)不同的蛋白質(zhì)需要開(kāi)發(fā)特定的配體和方法。采用保護(hù)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能完整性的溫和條件，已成功地通過(guò)一步親和層析從粗提物中純化出了多種重組蛋白，純度達(dá)90％以上。（Arnauetal.2006）。然而...

細(xì)胞傳代時(shí)，有那些注意事項(xiàng)？A）所有試劑應(yīng)達(dá)到室溫再使用，請(qǐng)勿在37℃下預(yù)熱任何試劑；B）請(qǐng)勿過(guò)渡消化，應(yīng)嚴(yán)格參照說(shuō)明書操作；C）在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化的整個(gè)過(guò)程；D）當(dāng)細(xì)胞變圓且仍然附著，用手拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞分離（如果細(xì)胞變圓且未經(jīng)拍打自行分離，說(shuō)明細(xì)胞過(guò)渡消化了）。

原代細(xì)胞能否用于轉(zhuǎn)染？可以的，系列轉(zhuǎn)染試劑盒可以將DNA轉(zhuǎn)染至原代的內(nèi)皮細(xì)胞、上皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、角質(zhì)形成細(xì)胞以及細(xì)胞系中。研究人員發(fā)現(xiàn)Cytofect™系列轉(zhuǎn)染試劑盒與其他品牌轉(zhuǎn)染試劑相比具有較高的轉(zhuǎn)染效率以及較低的毒性。為了給客戶提供方便，Cytofect™系列轉(zhuǎn)染試劑盒包含轉(zhuǎn)染試劑、增強(qiáng)劑、轉(zhuǎn)染培養(yǎng)基、生長(zhǎng)培養(yǎng)基。

我們的大腦如何對(duì)機(jī)體選擇做出反應(yīng)？我們通常會(huì)認(rèn)為，選擇會(huì)導(dǎo)致行動(dòng)的發(fā)生，但在大腦中是如何發(fā)生的？從直觀上來(lái)講，首先我們會(huì)在很多選項(xiàng)中選擇，比如，當(dāng)臨近黃色交通燈時(shí)，我們就需要決定要停車還是加速?zèng)_過(guò)去；下一步大腦中合適的運(yùn)動(dòng)反應(yīng)就會(huì)被選擇并且被執(zhí)行，在這種情況下，我們就會(huì)將腳向左或者右移動(dòng)；從傳統(tǒng)上來(lái)講，有推測(cè)認(rèn)為分離的大腦區(qū)域負(fù)責(zé)著不同階段的進(jìn)行，尤其是運(yùn)動(dòng)皮質(zhì)能夠在不影響選擇本身的情況下來(lái)進(jìn)行zui終的反應(yīng)選擇。近日，刊登在雜志NatureCommunications上的一...

中科院微生物所有望攻克植物黃萎病郭惠珊8年前的那個(gè)心愿終于實(shí)現(xiàn)了。9月26日，《自然—植物》雜志發(fā)表了郭惠珊團(tuán)隊(duì)的新成果，該研究揭示了他們利用基因“小剪刀”——RNAi創(chuàng)建的抗黃萎病棉花新品系，來(lái)有效擊棉花“癌癥”黃萎病的秘密。2008年8月，中科院微生物所研究員郭惠珊*次在新疆看到綿延不斷的棉田。然而，她看到的不是令人欣喜的豐收景象，而是一片枯黃，遍地落葉，還有棉農(nóng)絕望的面孔。這一幕像釘子一樣扎在她心里，讓她*地想了解黃萎病究竟是怎么一回事。zui近，郭惠珊團(tuán)隊(duì)先后發(fā)表了3...

趙曉菁：警惕油煙致癌，做頓飯等于抽兩包煙目前，中國(guó)肺癌發(fā)病率接近發(fā)達(dá)國(guó)家水平，肺癌已成為惡性腫瘤死亡*原因，其中男性肺癌發(fā)病率和死亡率均占所有惡性腫瘤的*位，女性發(fā)病率和死亡率均占第二位。據(jù)統(tǒng)計(jì)，我國(guó)肺癌發(fā)病率每年增長(zhǎng)26.9%，過(guò)去30年間，肺癌死亡率上升了465%，預(yù)計(jì)到2020年，我國(guó)肺癌病人將達(dá)到80萬(wàn)，死亡70萬(wàn)。從事胸外科專業(yè)近二十年，上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬仁濟(jì)醫(yī)院胸外科主任趙曉菁擅長(zhǎng)肺、縱隔、氣管等疑難疾病的診斷和手術(shù)治療，尤其擅長(zhǎng)運(yùn)用胸腔鏡和縱隔鏡等微創(chuàng)方式診...